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犬类精液超低温冷冻保存方法技术

来源：萌宠菠菠乐园时间：2025-02-28 20:07

本发明专利技术涉及一种犬类精液超低温冷冻保存方法，属于动物繁殖技术领域。将果糖、柠檬酸、三羟甲基胺基甲烷依次溶解于蒸馏水中，制得防冻液的缓冲液；将Ｎ－乙酰基－Ｄ－葡萄糖胺溶解于蒸馏水中，再加入氨基－钠－十二烷基硫酸酯和卵黄，混合均匀后在２０～３０℃下放置２４～４８小时，然后离心取上清液，加入到缓冲液中，并加入甘油或二甲基亚砜、杀菌剂，蒸馏水定容配制成防冻液；再利用防冻液将犬类精液稀释，降温平衡后进行包装冷冻，制成细管冻精放入液氮中保存。使用时再进行精子复苏解冻。本发明专利技术能够有效延长犬精子超低温冷冻保存的存活时间，提高犬冻融精子的活力、质膜完整性及顶体完整性，提高冻精人工输精的受孕率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种，用于犬精子超低温冷冻保存以及利用冻精进行人工授精繁殖育种，属于动物繁殖

技术介绍
自从Polge等(1949)用甘油作为防冻剂冷冻保存精子成功以来，精子低温冷冻保存研究在家畜、一些野生动物和人类中都取得了很大的发展，并逐渐成为生物多样性、遗传资源迁地保护的一个重要手段。对优良家畜如猪、马、牛、羊和犬的育种繁殖，挽救濒危动物都有着极其重要的实践意义。犬作为最早驯养的家畜动物，在人类生产生活中发挥着特有的作用，优良种犬的社会需求更是与日俱增。在世界宠物犬市场中可以发现，名贵犬种正以其独特的身价、良好的开发前景逐渐被人们所接受，优质宠物犬将以它高品质受到更多人的青睐。随着人类饲养技术、繁殖水平的提高，宠物饲养种类越来越多。我国犬的品种不仅以特有的使用和观赏价值著称于世界，而且对世界著名品种的形成产生过重要的影响，如西藏的马士迪夫(獒)、西施犬、北京犬、西藏拉萨犬(埃普索犬)等，作为珍贵犬的品种资源，已经成为世界人民的共同财富。我国城乡居民随着经济条件的改善，饲养宠物的人越来越多，人们已经意识到饲养宠物犬所带来的巨大经济效益，已把人工饲养宠物犬作为一种新兴饲养业来发展，宠物犬除了进入人类的物质生活外，逐渐进入人类的精神生活。目前国内各地区已经广泛开展了犬的人工养殖，现有宠物犬上亿只。同我国饲养的犬相比，国外犬品种繁多、质量较高，尤其是新型品种价格昂贵。其主要原因是人工繁殖技术的应用，通过人工授精技术杂交改良原有犬品种，既能克服不同品种间自然交配难题，又能通过杂交优势培育出新型品系，产生良好的经济效益。然而我国犬的繁殖育种仍然采用传...

【技术保护点】
一种犬类精液超低温冷冻保存方法，其特征在于按如下步骤进行：１）将果糖０．４５～３．１０ｇ、柠檬酸０．５０～２．３０ｇ、三羟甲基胺基甲烷１．１０～３．９０ｇ依次溶解于５０ｍＬ蒸馏水中，制得防冻液的缓冲液；２）将０．０１～０．１０ｇＮ－乙酰基－Ｄ－葡萄糖胺溶解于２０ｍＬ蒸馏水中，溶解温度为２０～３０℃，完全溶解后依次加入０．０５～２．５０ｍＬ氨基－钠－十二烷基硫酸酯和１５．０～３０．０ｍＬ卵黄，混合均匀后在２０～３０℃下放置２４～４８小时，然后以１０００ｇ～５０００ｇ的速率离心５～１０分钟，取上清液；３）将上清液加入到防冻液的缓冲液中，并加入甘油或二甲基亚砜２．０～８．０ｍＬ、杀菌剂１０００ＵＩ／ｍＬ，蒸馏水定容１００ｍＬ配制成防冻液；４）在１８～２５℃条件下，将犬类精液与防冻液按体积比１∶３混合，得到稀释的精液，在４～８℃条件下降温平衡１．５～３．５小时，然后进行包装冷冻，包装的体积为０．２０ｍＬ～０．７５ｍＬ，冷冻速率为２５．０～４０．０℃／分钟，制成细管冻精放入液氮中保存；５）使用时，精子复苏的解冻速率为 ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李新红，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]