介绍犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立过程、实验方法和实际应用效果.docx

介绍犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立过程、实验方法和实际应用效果

目录

介绍犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立过程、实验方法和实际应用效果（1）

一、内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

研究背景和意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

研究目的和任务．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

二、犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法建立过程．．．．．．．．．．．．．．．．5

犬幽门螺杆菌生物学特性研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

1.1幽门螺杆菌生长环境及特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.2犬幽门螺杆菌感染机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

荧光定量PCR技术原理及特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1荧光定量PCR技术基本原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.2荧光定量PCR技术特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

3.1犬幽门螺杆菌特异性基因检测序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

3.2荧光定量PCR检测试剂与仪器选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

3.3检测方法操作流程设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

三、实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

1.1样本来源及处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

1.2主要试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

实验设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

2.1犬幽门螺杆菌培养及DNA提取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.2特异性引物与探针设计合成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

2.3荧光定量PCR反应体系建立与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.4检测方法灵敏度与特异性验证实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

四、实验结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

犬幽门螺杆菌DNA提取结果分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

荧光定量PCR检测结果分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

五、实际应用效果评价及讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

介绍犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立过程、实验方法和实际应用效果（2）

一、内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

二、犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立过程．．．．．．．．．．．．．27

研究背景与目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

（1）实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

（2）实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

（3）检测结果分析与判定标准．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

实验结果及讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

（1）PCR反应体系的优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

（2）引物设计与筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

（3）实验结果的特异性、灵敏度和稳定性分析．．．．．．．．．．．．．

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