仓鼠的体外受精技术

仓鼠的体外受精技术

2015年03月20日 来源：《实验动物管理与实用技术手册》 作者：徐国景 易工城 唐利军 孔利佳 责任编辑：lmjinfo

( 一 ) 卵母细胞收集

幼年仓鼠（体重40～70g）超数排卵：首先皮下或注射PMSG25～30IU，48～56h后注射

 HCG10～20IU。在 HCG 注射后 12～14h 收集卵母细胞,每只仓鼠平均可得卵36枚。

成年仓鼠(80～130g)超数排卵:在发情后期注射较好。在发情后期 , 雌仓鼠阴道分泌出一种白色黏稠性强的有特殊气味的蒙黏液。在早晨观察到有此黏液者,可以腹腔注射25IU PMSG,第3天即可发情,第4天上午 6~8 时,可收集刚排出的卵母细胞。另一种方法是先注射PMSG 2O～3OIU,49～63h后注射HCG2O～3OIU,11～14h 后可排卵,每只可得卵 20～50 个。

( 二 ) 收集精子

把辜丸及附睾摘出,放在滤纸上,分离出附辜尾部,并在滤纸上把脂肪体、血液等吸除干净。然后剖开附睾尾管,将内容物轻轻刮入培养液中,精子快速扩散,几分钟内就形成均一的精子悬液。

仓鼠精子获能液和受精液为 TCM-199,加入灭活血清。最适宜的渗透压为 292～392mOs,pH6.8～8.2。适宜精子密度为(4.0～6.0)×106个 /ml。

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