斑马鱼行为篇㊾:斑马鱼繁殖行为
鱼类繁殖成功的关键在于它的繁殖行为,而正常的繁殖行为有利于鱼类种群的繁衍和生态系统的稳定。截至目前,尽管有许多研究报道了氨氮胁迫对鱼类的不利影响,但关于氨氮影响鱼类繁殖的研究主要集中在繁殖结果(即产卵量)上,缺乏对繁殖行为的研究。斑马鱼(Daniorerio)是一种热带淡水鱼,因具有个体小、易饲养、繁殖周期短、胚体透明等特点,故常被应用于各种疾病的研究、药物筛选与研发、环境监测与化学品风险评估等领域,是一种非常重要的模式生物。此外,由于斑马鱼的繁殖行为不受季节的影响,求偶行为每日都可进行,因此可作为鱼类繁殖行为研究的重要模型。斑马鱼的繁殖行为包括雌鱼和雄鱼之间的身体触碰、追逐、并行游泳、雄鱼在雌鱼周围或在雌鱼前面游动、雄鱼身体颤动、雌鱼露出一侧或在雄鱼面前上下游动、雌鱼产卵等。
实验方法:
选取健康且规格一致的成年斑马鱼共48尾,雌鱼和雄鱼各24尾,两者的平均体质量分别为0.51,0.34g。将实验鱼放入12个规格一致的塑料小盆中,每盆中雌鱼和雄鱼各2尾,盆内盛水2L。设置1个对照组和3个氨氮胁迫处理组。对照组不加入NH4C1(水体氨氮名义质量浓度为0),3个氨氮胁迫处理组分别加入定量的NH4C1使水体氨氮质量浓度分别为5,10和20mg·L-1,每个组均有3盆共计12尾雌雄各半的实验鱼。整个实验处理时间为96h,于第48h换掉50%体积的水并保证各组水体氨氮质量浓度不变。实验鱼每日9:00和17:00喂食各1次,日投喂量为实验鱼平均体质量的1%左右。实验水温控制在28℃左右,水体pH调为7.4,水体溶解氧质量浓度大于或等于6mg·L-1,光周期为14h光照∶10h黑暗。
实验处理96h后,对实验鱼的繁殖行为进行拍摄。拍摄开始前1日20:00开始进行相关准备:将同一实验组的1尾雌鱼和1尾雄鱼放入尺寸为29cm×20cm×22cm的玻璃缸中,其中盛有10L水,水中氨氮质量浓度与2尾鱼所在实验组设定的氨氮质量浓度相同,水温控制在28℃左右;用隔板将雌鱼和雄鱼隔开,同时,在缸底部的右上角放1个尺寸为10cm×10cm×2cm的装有数个小石头的塑料盒,营造产卵环境并防止斑马鱼食卵;玻璃缸上方安装摄像机支架。次日7:00开灯后抽开隔板,使鱼适应5min后进行正式摄像,拍摄时长为20min。实验鱼繁殖行为的拍摄分两日进行,每日上午同一时间同时拍摄每个实验组的3对实验鱼。拍摄结束后约2h,移除亲鱼,收集受精卵并统计产卵量。所有拍摄的视频均由同一人进行分析,统计20min内斑马鱼的以下8个繁殖行为参数:1)触碰次数,即雄鱼用头触碰雌鱼身体次数;2)追逐次数,即雄鱼追逐雌鱼次数;3)雌鱼单独进入产卵区的次数;4)雄鱼单独进入产卵区的次数;5)雌鱼和雄鱼同时进入产卵区的次数;6)雌鱼单独停留在产卵区的时间;7)雄鱼单独停留在产卵区的时间;8)雌鱼和雄鱼同时停留在产卵区的时间。行为拍摄和统计均以每对鱼为单位进行,每个实验组分别拍摄和统计6对鱼,即样本量n=6。
结果分析:
雌鱼和雄鱼同时进入产卵区的次数随着氨氮质量浓度的升高而逐渐下降;与对照组的雌鱼和雄鱼同时进入产卵区的次数相比,氨氮质量浓度为5mg·L-1处理组的这一指标没有明显差异,但在氨氮质量浓度为10和20mg·L-1处理组中这一指标降低。然而,对照组和3个氨氮胁处理组的雌鱼和雄鱼同时在产卵区停留的时间无明显差异。
氨氮胁迫对雌、雄斑马鱼同时进入产卵区的次数和停留时间的影响
斑马鱼繁殖行为的早期表现为触碰和追逐,其他繁殖行为则在该行为之后发生。除了触碰和追逐,雌鱼和雄鱼单独和同时进入产卵区的次数及停留时间也是评估斑马鱼繁殖行为的重要参数。
斑马鱼的繁殖行为受到内源和外源性因素的影响。就内源性因素来看,性腺发育情况及体内性激素水平与鱼类的繁殖行为及产卵量密切相关,并受到中枢神经系统及下丘脑-垂体-性腺轴的调控。就外源性因素而言,环境因子(如光照)和化学信号在求偶行为中也发挥着十分重要的作用。
参考文献:
1、陈启亮,段雨池,马跃岗,等.氨氮胁迫对斑马鱼繁殖行为的影响[J].重庆师范大学学报(自然科学版),2020,37(06):39-44.
2、Tributyltin impaired reproductive success in female zebrafish through disrupting oogenesis, reproductive behaviors and serotonin synthesis[J]. Wei-Yang Xiao;;Ying-Wen Li;;Qi-Liang Chen;;Zhi-Hao Liu.Aquatic Toxicology,2018
3、急性光周期紊乱对斑马鱼繁殖行为的影响[J]. 陈鑫;盛尚;江涛;刘智皓.重庆师范大学学报(自然科学版),2019(01)
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