心理应激对小鼠中枢及外周免疫器官IL
【摘要】:实验目的通过小站台水环境应激建立心理应激动物模型,探讨心理应激对机体中枢及外周免疫器官和组织IL-6表达的影响及中药的干预作用,为情志致病的研究提供一定的可靠依据。实验材料和方法82只昆明小鼠随机分为7组:正常组、8h应激组、8h干预组、24h应激组、24h干预组、72h应激组、72h干预组。各应激组和干预组分别给予小站台水环境应激,各应激组给予蒸馏水灌胃,各干预组同时给予中药加味逍遥散干预。于应激8h、24h、72h后摘眼球取血,离心后取血浆。处死后小鼠在冰面上取下丘脑、左脑、右脑、胸腺、肠系膜淋巴结、脾脏,分别称重。再将各组织匀浆,测匀浆液中蛋白浓度,最后用ELISA法检测小鼠血浆、下丘脑、左脑、右脑、胸腺、肠系膜淋巴结中IL-6浓度。实验结果小站台水环境应激能显著降低动物的体重、胸腺指数、脾脏指数。同一种应激方式、不同应激时间对小鼠中枢及外周免疫器官IL-6表达的影响不同,具体结果如下:①小站台水环境应激8h可以升高小鼠血浆中IL-6的水平(p<0.01),但24h应激可见血浆中IL-6的水平降低(p<0.01),应激72h则小鼠血浆中IL-6的水平与正常无显著差别(p>0.05),提示机体存在着一种自我调节机制,使血浆中IL-6的水平维持相对平衡。8h干预组小鼠血浆中IL-6水平较应激组低(p<0.05),其他时间点无差异,可见加味逍遥散能在一定程度上调节血浆中IL-6的水平。②随应激时间的延长,小鼠肠系膜淋巴结表达IL-6的水平呈上升趋势,仅8h应激组、24h应激组小鼠肠系膜淋巴结IL-6水平明显高于正常组(P<0.01),72h应激组与正常组无显著差异(p>0.05)。加味逍遥散对8h应激、24h应激引起的肠系膜淋巴结IL-6表达升高均有下调的作用(P<0.05)。③该心理应激对小鼠胸腺表达IL-6的影响较肠系膜淋巴结强。随应激时间的延长,小鼠胸腺表达IL-6水平逐渐升高,24h应激组、72h应激组胸腺中IL-6的表达明显高于正常组(P<0.01),提示心理应激对中枢免疫器官—胸腺的影响迟于周围免疫器官。同时,加味逍遥散随应激时间的延长,下调胸腺分泌IL-6的作用更明显。④小站台水环境应激对与情绪密切相关的下丘脑表达IL-6的影响亦因时间的不同而存在差异。8h应激组、24h应激组小鼠下丘脑IL-6的表达明显高于正常组(P<0.01),72h应激组与正常组无显著性差异(P>0.05),提示下丘脑能在一定范围内保持IL-6水平的动态平衡。加味逍遥散也能调节8h应激、24h应激引起下丘脑内IL-6水平的升高,提示加味逍遥散可以作用于中枢神经系统。⑤小站台水环境应激对小鼠左、右脑内IL-6的分泌仅在24h应激时出现明显的升高(P<0.01),8h应激、72h应激对其影响不显著(P>0.05),提示小鼠左脑、右脑对心理应激的反应晚于下丘脑,同时也说明小鼠左、右脑内存在着较强的平衡功能。加味逍遥散能明显降低24h应激引起的左、右脑IL-6的升高(P<0.01),提示加味逍遥散可以直接作用于左、右脑调节IL-6的分泌。实验结论①小站台水环境应激先伤机体神气,继而引起形体变化和脏腑组织的病理改变。②小站台水环境不同时间的应激可影响血浆IL-6的水平及胸腺、淋巴结等组织IL-6的表达,说明IL-6可能与心理应激引起的细胞和组织损伤及血管损害有关。③心理应激可影响中枢下丘脑、左脑、右脑中IL-6的表达,而且下丘脑对心理应激的反应比左、右脑更敏感。④小站台水环境应激以肝气郁结证为主,中药加味逍遥散可在一定程度上调节上述中枢组织及外周免疫器官IL-6的表达,提示IL-6可能被作为肝气郁结证肝郁化火状态的检测指标之一。
【学位授予单位】:中国中医科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
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