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金黄地鼠(Mesocricetus auratus)朊蛋白基因的克隆及其原核表达

来源:萌宠菠菠乐园 时间:2024-10-15 01:08

《中国兽医学报》 2008年12期

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李玉荣   霍桂桃   周向梅   尹晓敏   赵德明   开通知网号

【摘要】:采用RT-PCR技术从金黄地鼠(Mesocricetus auratus)脑组织获得朊蛋白基因(Prion protein nucleic acid,PRNP)开放阅读框(Open reading frame,ORF),截去其N端信号肽(66 bp)和C端GPI锚定位点(69 bp)形成朊蛋白编码区PRNPx;将编码区重组于融合表达质粒Pet-DsbA中,并在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中经IPTG诱导表达,并经Western-blot验证。结果表明,金黄地鼠PRNP基因ORF区全长为765 bp,编码254个氨基酸的前体蛋白,核苷酸序列与已发表金黄地鼠序列(M14054)同源性为99.87%,其第116个氨基酸发生了同义突变由GCT变为GCC;朊蛋白在大肠杆菌得到高效表达,产物是相对分子质量为47 000的融合蛋白。

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网址: 金黄地鼠(Mesocricetus auratus)朊蛋白基因的克隆及其原核表达 https://www.mcbbbk.com/newsview374505.html

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