不同类型激活剂刺激中性粒细胞后的 NETosis 发展阶段,International Journal of Molecular Sciences

在释放 NET 之前，中性粒细胞会发生结构变化。首先，它变平，伴随着细胞形状的变化和细胞骨架的重新排列。然后，核开始膨胀，最终将 NET 喷射到细胞外空间。我们使用宽场和共焦荧光显微镜来记录中性粒细胞在激活和 NETosis 过程中的形态和结构变化。使用了不同类型的激活剂，例如 NOX 依赖性 PMA 和钙离子载体 A23187。测量是在一系列连续的阶段中进行的。在第一阶段（添加激活剂后 30 秒以及刺激中性粒细胞后立即），研究了中性粒细胞对 A23187 和 PMA 暴露的反应。随后，在较长一段时间内（30、60、120、180 和 240 分钟）检查中性粒细胞在不同激活阶段的特征。单独分析了NETosis发展的具体特征。在最初的 30 秒内，中性粒细胞的肌动蛋白细胞骨架的形状和结构似乎是异质的。特征性细胞形状包括 30 英寸 1 型细胞，形状与对照相似，F-肌动蛋白集中在细胞质中心，以及 30 英寸 2 型细胞，其形状扁平（展开），额叶尺寸增加，F-肌动蛋白集中在细胞质中心。肌动蛋白分布于整个细胞。随后，评估了核肿胀的发展、中性粒细胞膜的相应变化以及 NET 释放到细胞外空间的情况。揭示了决定染色质喷射起始的条件和解浓缩染色质喷射的两种特征类型。获得的结果有助于更好地了解中性粒细胞激活和 NETosis 发展的生物物理机制。

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