广东省宠物犬猫弓形虫病流行病学调查及Real

【摘要】： 弓形虫病是一种由刚地弓形虫引起的严重危害人类和动物健康的人兽共患病,其可在多种动物中寄生。随着中国人民生活水平提高,宠物养殖量逐年增多,人和宠物的接触更加密集,这极大的增加了弓形虫从宠物传播到人的风险。然而目前国内对宠物弓形虫流行病学研究数据依然匮乏。为了掌握广东省宠物犬猫弓形虫的流行特点,本研究在2016年2月到2018年12月,从广东省主要宠物养殖地区广州,深圳,佛山,江门和汕头收集到犬猫血液样品990份,流浪犬猫血液样品32份。通过酶联免疫吸附实验(ELISA)和探针法荧光定量PCR对宠物犬猫和流浪犬猫的弓形虫Ig G抗体和核酸检测发现,宠物犬和猫的抗体阳性率分别为2.36%和3.64%,流浪犬和流浪猫的抗体阳性率分别为76%和86.67%,说明整体宠物感染率低,但存在一定的风险,流浪犬猫的感染率显著高于宠物犬猫,说明流浪犬猫是重要的风险因素。病原学检测发现,宠物犬猫的阳性率分别为0.91%和2.28%,检出率和比Ig G抗体检出率低,但趋势一致,说明多种方法配合使用能为流行病学调查提供更多依据。通过对不同地区、不同季节、不同年龄和不同年份的抗体检出水平比较发现,不同地区和年龄的犬猫的感染水平有一定差异,即经济水平较高的地区如广州深圳宠物感染率相对较低,年龄较大的犬犬猫感染阳性率明显升高。不同季节和年份的犬猫感染在抗体水平上水平差异不大。快速检测方法是动物疫病诊疗过程中的必备手段,本研究基于临床的检测需求,选择弓形虫检测最特异和灵敏的基因529 bp重复序列作为检测的靶标,建立了一种快速高效的、特异性更高的弓形虫荧光定量检测方法。结果显示,该方法特异性为100%,能够覆盖目前基因库中绝大多数弓形虫重复序列,为已知检测引物中覆盖率最高的。该方法稳定性好,标准曲线R~2值在0.999以上。另外,本检测方法最低检测限分别为10 copies/μL,灵敏度是普通PCR的100倍以上,并且该方法操作简便,在临床宠物样品的检测验证中效果良好,为宠物和其他物种弓形虫病的快速诊断提供了方法学依据。

【学位授予单位】：华南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019

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