一种重组合成宠物饲料蛋白及生产工艺

摘要： 本发明涉及一种重组合成宠物饲料蛋白技术领域，且公开了一种重组合成宠物饲料蛋白，所述重组合成宠物饲料蛋白序列如SEQ ID1 16.2所示，所述重组合成宠物饲料蛋白的肽链片段序列如SEQ ID2 24.5所示。该重组合成宠物饲料蛋白及生产工艺，将蛋白加入到宠物饲料加工过程中代替肉类，使得宠物食品的蛋白质成分将具有高达50％的蛋白质水平、7％的脂肪水平和35％的碳水化合物，满足狗和猫的生长和繁殖主要膳食类别的最低蛋白质要求，能够创建氨基酸谱(亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸等)以及来自酵母的强烈鲜味，通过从内到外提高宠物食品的适口性食物矩阵，与市场上大多数颗粒或粗磨产品的表面消化风味涂层相比，这种独特的完全集成的风味系统将使宠物食品对宠物更具吸引力。

主分类号：

C07K14/47(2006.01)(具有多于20个氨基酸的肽；促胃液素；生长激素释放抑制因子；促黑激素；其衍生物)

权利要求：

1.一种重组合成宠物饲料蛋白，其特征在于，所述重组合成宠物饲料蛋白的肌肉蛋白序列如SEQ ID1 16.2所示，所述细胞合成蛋白的肽链片段序列如SEQ ID2 24.5所示。 2.根据权利要求1所述的一种重组合成宠物饲料蛋白，其特征在于，所述重组合成宠物饲料蛋白的分子量如SEQ ID3 20.7和SEQ ID4 42.2KDa所示，所述肽链片通过NdeI和HindIII亚克隆到枯草芽孢杆菌穿梭载体pT7M上。 3.根据权利要求1所述的一种重组合成宠物饲料蛋白，其特征在于，所述重组合成宠物饲料蛋白的宿主为枯草芽孢杆菌7024E细胞，所述重组合成宠物饲料蛋白产生合成蛋白产生单克隆菌落接种后在12.5μg/ml四环素的LB培养基中37℃摇床200转震荡培养。 4.根据权利要求1所述的一种重组合成宠物饲料蛋白，其特征在于，所述光密度达到0.6-0.8后通过添加木糖诱导，培养过程中的温度控制为25-37℃培养。 5.根据权利要求1所述的一种重组合成宠物饲料蛋白，其特征在于，生产过程包括以下重量份数配比的原料：NdeI内切酶0.1-10ppm、HindIII限制性内切酶0.1-10ppm、枯草芽孢杆菌0.1-2％、和木糖2％。 6.一种重组合成宠物饲料蛋白的生产工艺，其特征在于，包括以下步骤： 1)NdeI内切酶和HindIII限制性内切酶克隆肌肉蛋白到枯草芽孢杆菌穿梭载体pT7M上； 2)转化枯草芽孢杆菌为7024E细胞，转换之后将合成蛋白产生单克隆菌落接种后在12.5-14μg/ml四环素的LB培养基中30-37℃温度下摇床以150-200转震荡速度培养； 3)当培养皿中OD达到0.6-0.8后通过添加2-5％木糖诱导，然后在25-37℃的温度下培养至细胞离心沉淀； 4)细胞离心沉淀以后用超声波裂解破壁，溶剂为50mMTris，酸碱度为6-7.5，从而形成可溶性肌肉蛋白。 7.根据权利要求6所述的一种重组合成宠物饲料蛋白，其特征在于，所述步骤二中枯草芽孢杆菌穿梭载体通过向反应皿内加入枯草芽孢杆菌形成载体。 8.根据权利要求6所述的一种重组合成宠物饲料蛋白，其特征在于，所述步骤三中采用四环素的LB培养基时一般采用15ml-20ml倒一个板子，培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟，用封口胶封边，并倒置放于4℃保存。 9.根据权利要求6所述的一种重组合成宠物饲料蛋白，其特征在于，所述步骤四中细胞离心沉淀过程中将液体沉淀8-10h后取出，将标本离心浓缩后得到可溶性肌肉蛋白，用肌肉蛋白代替肉类进行宠物饲料加工。

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