一种保护犬猫肝脏的复合益生菌制剂及制备方法与流程

1.本发明涉及宠物保健制品领域，特别涉及一种保护犬猫肝脏的复合益生菌制剂及制备方法。

背景技术：

2.肝脏是犬猫机体最重要的器官之一，生理功能广泛，主疏泄、主藏血、主筋，开窍于目，血液、筋骨、脾胃、精神、双目等无一不与肝脏的生理功能密切相关。犬猫的肝脏疾病非常常见，对犬猫机体的损伤和危害不可估量。因此，动物主人和宠物医生都应该重视犬猫的肝脏疾病，及早发现，及早治疗。
3.宠物一旦出现肝脏问题就会表现出精神沉郁、食欲不振或废绝、呕吐、发热、贫血、黄疸和肝脏压痛、腹泻和消瘦等症状，就需要及时调整猫咪的饮食结构。主要有以下几个方面：
4.1.呈现精神沉郁、食欲不振或废绝、呕吐、腹泻和消瘦等症状；
5.2.肝细胞损伤严重时，呈现重度肝功能不全症状，出现食欲废绝、呕吐、黄疸、腹痛和出血倾向；
6.3.表现发热、贫血、黄疸和肝脏压痛；
7.4.知觉过敏或钝麻、嗜眠或昏睡、异常步态或不能站立、痉挛等神经症状。
8.所以，针对现有技术存在的以上问题，有必要设计一种保护犬猫肝脏的复合益生菌制剂及制备方法，以解决上述问题。

技术实现要素：

9.本发明公开了一种保护犬猫肝脏的复合益生菌制剂及制备方法，主要由以下原料炮制加工而成：葛根花、薏苡仁、泽泻、桔梗、枸杞、乌梅。经过加水浸泡、加热回流、低压旋蒸、真空干燥、粉碎过筛等工艺制成的可溶于水的提取物粉末。
10.葛根花，为豆科植物葛的干燥花蕾。具有解毒醒脾的功能。性味甘平，醒脾和胃解渴，主治饮酒过度头痛头昏、烦渴呕吐、胸膈饱胀等症。《脾胃论》有葛花解酲汤，《滇南本草》有葛花清热丸等。用于头痛，头昏，烦渴，胸膈饱胀，呕吐酸水等伤及胃气之症。
11.薏苡仁，为著名中药，健脾渗湿，除痹止泻，清热排浓。用于水肿，脚气，小便不利，湿痹拘挛，脾虚泄泻，肺痈，肠痈；扁平疣。
12.泽泻，性味甘，寒。入肾、膀胱经。利水，渗湿，泄热。治小便不利，水肿胀满，呕吐，泻痢，痰饮，脚气，淋病，尿血。《本经》：主风寒湿痹，乳难，消水，养五脏，益气力，肥健。现代药理作用研究：具有良好的肝脏保护和利尿作用作用。泽泻醇a乙酸酯、泽泻醇b乙酸酯和泽泻醇c乙酸酯可保护因四氯化碳中毒的小鼠肝脏，其中以泽泻醇c乙酸酯效果最好。
13.桔梗，化湿开胃，温脾止泻，理气安胎。用于湿浊中阻，脘痞不饥，脾胃虚寒，呕吐泄泻，妊娠恶阻，胎动不安。
14.枸杞，中药称枸杞子，性味甘平。养肝、滋肾、润肺。主要成份含甜菜碱，阿托品，天
仙子胺。
15.乌梅，味酸、涩，性平。具有敛肺，涩肠，生津，安蛔之功效。常用于肺虚久咳，久泻久痢，虚热消渴，蛔厥呕吐腹痛。
16.本发明提供的技术方案是：一种保护犬猫肝脏的复合益生菌制剂，所述复合益生菌制剂由中药提取物和益生菌菌液混合配置而成，中药组方由以下重量份的原料制成：葛根花3～9份、薏苡仁3～6份、泽泻6～12份、桔梗6～15 份、枸杞5～15份、乌梅6～12份。
17.优选的技术方案为：所述益生菌菌液为1.5％的一种或两种及以上双歧杆菌菌液。
18.一种保护犬猫肝脏的复合益生菌制剂制备方法，包括以下步骤：
19.a.取葛根花3～9份重量份、薏苡仁3～6份重量份、泽泻6～12份重量份、桔梗6～15份重量份、枸杞5～15份重量份、乌梅6～12份重量份，混合得到中药组方混合物；
20.b.中药组方混合物中加入3倍体积量水，冷浸1h，加热回流2h，提取两次，过滤合并滤液，滤液浓缩得到浓缩滤液；
21.c.浓缩滤液60℃真空干燥24h，然后粉碎，过80目筛，得到中药提取物粉末；
22.d.向中药提取物粉末中加入葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、酵母粉和无机盐，使溶解并搅拌均匀，调节ph值至7.0，于115℃高温高压灭菌1小时，得无菌中药提取物；
23.e.待无菌中药提取物温度降至39℃时，接种预培养的体积百分比为1.5％的一种或两种及以上双歧杆菌菌液，常规培养约5小时后；再次接种预培养的体积百分比为1.5％的一种或两种及以上乳杆菌菌液，继续培养30小时，待ph值降至4.0以下时，结束发酵，得发酵液；
24.f.发酵液过滤得发酵上清液，过滤后的药渣中加入7倍体积量水，保持微沸30分钟，过滤得煎液，煎液与发酵上清液合并后加入低聚果糖浆，搅拌均匀，加蒸馏水或浓缩定容，于115℃高温高压灭菌40min，即得产品。
25.由于上述技术方案运用，本发明具有的有益效果为：
26.本发明所用药物包括葛根花、薏苡仁、泽泻、桔梗、枸杞、乌梅均为药食同源药物。引用后，可以升高犬猫血液中谷草转氨酶、谷丙转氨酶和甘油三酯水平，保护犬猫的肝脏。减轻其乏力、头晕、呕吐、心跳加速、血压升高症状，缓解神经紧张症状。
具体实施方式
27.以下将结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于对本发明进行说明，而不是用于限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
28.实施例1
29.一种保护犬猫肝脏的复合益生菌制剂制备方法，包括以下步骤：
30.a.取葛根花(9g)、薏苡仁(6g)、泽泻(12g)、桔梗(15g)、枸杞(5g)、乌梅(15g)混合得到中药组方混合物；
31.b.中药组方混合物中加入3倍体积量水，冷浸1h，加热回流2h，提取两次，过滤合并滤液，滤液浓缩；
32.c.浓缩滤液60℃真空干燥24h，粉碎，过80目筛，得到中药提取物粉末；
33.d.中药提取物粉末中加入葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、酵母粉和无机盐，使溶解并搅拌均匀，调节ph值至7.0，于115℃高温高压灭菌1小时，得无菌中药提取物；
34.e.待无菌中药提取物温度降至39℃，接种预培养的体积百分比为1.5％的一种或两种及以上双歧杆菌菌液，常规培养约5小时后；再次接种预培养的体积百分比为1.5％的一种或两种及以上乳杆菌菌液，继续培养30小时，当ph值降至4.0以下时，结束发酵，得发酵液；
35.f.发酵液过滤得发酵上清液，过滤后的药渣中加入7倍体积量水，保持微沸30分钟，过滤得煎液，煎液与上述发酵上清液合并后加入低聚果糖浆，搅拌均匀，加蒸馏水或浓缩定容，于115℃高温高压灭菌40min，即得产品。
36.实施例2
37.一种保护犬猫肝脏的复合益生菌制剂制备方法，包括以下步骤：
38.a.取葛根花(12g)、薏苡仁(8g)、泽泻(15g)、桔梗(12g)、枸杞(5g)、乌梅(12g)混合得到中药组方混合物
39.b.中药组方混合物中加入3倍体积量水，冷浸1h，加热回流2h，提取两次，过滤合并滤液，滤液浓缩；
40.c.浓缩滤液60℃真空干燥24h，粉碎，过80目筛，得到中药提取物粉末；
41.d.中药提取物粉末中加入葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、酵母粉和无机盐，使溶解并搅拌均匀，调节ph值至7.0，于115℃高温高压灭菌1小时，得无菌中药提取物；
42.e.待无菌中药提取物温度降至39℃，接种预培养的体积百分比为1.5％的一种或两种及以上双歧杆菌菌液，常规培养约5小时后；再次接种预培养的体积百分比为1.5％的一种或两种及以上乳杆菌菌液，继续培养30小时，当ph值降至4.0以下时，结束发酵，得发酵液；
43.f.发酵液过滤得发酵上清液，过滤后的药渣中加入7倍体积量水，保持微沸30分钟，过滤得煎液，煎液与上述发酵上清液合并后加入低聚果糖浆，搅拌均匀，加蒸馏水或浓缩定容，于115℃高温高压灭菌40min，即得产品。
44.实施例3：
45.本发明保护犬猫肝脏的复合益生菌制剂的功效验证
46.1.实验步骤
47.(1)实验设置
48.动物：icr小鼠，周龄4-5w，分为模型组、空白对照组、阳性对照组(联苯双酯150mg/kg)、复合益生菌制剂低剂量组(150mg/kg)、复合益生菌制剂中剂量组(300mg/kg)、复合益生菌制剂高剂量组(600mg/kg)，共6组，每组8只。
49.实验周期15天。
50.(2)实验过程
51.模型组：灌胃生理盐水，最后一天，灌胃给予50％乙醇，0.16ml/10g，给予一次，禁食不禁水12小时后采集血液、组织进行检测；
52.空白对照组：灌胃给予生理盐水，1次/d，最后一天禁食不禁水12小时后采集血液、组织进行检测。
53.阳性对照组：灌胃给予联苯双酯-0.5％cmc-na溶液，150mg/kg(配制15 mg/ml溶
液，0.1ml/10g)，每天一次，最后一天灌胃药物60分钟后再灌胃给予50％乙醇，0.16ml/10g，禁食不禁水12小时后采集血液、组织进行检测；
54.复合益生菌制剂低剂量组：灌胃给予提取物样品水溶液，150mg/kg(配制 15mg/ml溶液，0.1ml/10g)，每天一次，最后一天灌胃药物60分钟后再灌胃给予50％乙醇，0.16ml/10g，禁食不禁水12小时后采集血液、组织进行检测；
55.复合益生菌制剂中剂量组：灌胃给予提取物样品水溶液，300mg/kg(配制 30mg/ml溶液，0.1ml/10g)，每天一次，最后一天灌胃药物60分钟后再灌胃给予50％乙醇，0.16ml/10g，禁食不禁水12小时后采集血液、组织进行检测；
56.复合益生菌制剂高剂量组：灌胃给予提取物样品水溶液，600mg/kg(配制 60mg/ml溶液，0.1ml/10g)，每天一次，最后一天灌胃药物60分钟后再灌胃给予50％乙醇，0.16ml/10g，禁食不禁水12小时后采集血液、组织进行检测；
57.给药结束后，收集血液和组织，记录小鼠每天的体重生长情况，检测血清中alt和ast，肝脏mda、adh和gsh-px。
58.(3)实验结果
59.表1和表2显示，与空白组对比，模型组血清ast和alt水平显著上升，肝组织mda显著上升，adh和gsh-px显著降低，提示造模成功。
60.表1各组ast和alt水平比较(x
±
s)
[0061][0062]
与模型组比较：
*
p《0.05,
**
p《0.01.
[0063]
表2各组mda、adh和gsh-px水平比较(x
±
s)
[0064]
[0065][0066]
与模型组比较：
*
p《0.05,
**
p《0.01.
[0067]
与模型组相比，联苯双酯对肝损伤有明显的保护作用；
[0068]
与模型组相比，提取物低、中、高剂量均显示出较好的保护肝损伤的活性，并呈现浓度依赖性；
[0069]
实验结论
[0070]
通过以上实施例证明，本发明提供的复合益生菌制剂，可以显著控制肝损伤后血清中alt和ast水平的升高，可以促进肝组织中adh和gsh-px的升高，抑制mda的上升，从而起到保肝效果。
[0071]
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神和技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

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